病例介绍

CytoFlex 2L6C的仪器，客户反馈做小鼠脾脏细胞检测，预实验发现PE和PC5通道的补偿怎么也调节不好。当把PE, PC5通道单染管按顺序调节成“横平竖直”了，回头发现PE单染管的某些通道补偿又明显不对了。PE-CD19,Percp-cy5.5 -CD45.

1）PE单染管（图一）：

2）Percp-cy5.5单染管（图二）：

3）回头再看PE单染管（图三）：

小贝问诊答疑

1） 要来原始数据分析发现，制备的样本空白细胞管都有“阳性信号”，荧光通道组合会有对角线火箭峰细胞存在。如图四箭头部分。

2） PE-CD19单染管，明显多出来一群细胞，B细胞的特点明显不会有类似弱阳，强阳两群存在，而且看起来像强阳的那一群不像是目的细胞。（图五中绿颜色细胞）。

3） 询问客户仪器质控及清洗情况了解到，已经好久没有做过质控，每次开机做实验会走清洗流程，但也好久没做过深度清洗，仪器平时做周期凋亡实验多。

4）空白管（图四）：

5）PE单染管（图五）