厌氧培养?益生菌研究?一切即将改变!

益生菌作为活细菌,包括一系列厌氧菌,如乳酸菌或双歧杆菌等。对人体具有促进健康和发挥生物功能的作用。它们可增加肠道所需微生物的数量,比如在抗生素治疗后等情况下促进肠道菌群再生,也可限制潜在致病菌的生长,同时还可以作为治疗性细菌活体药物。因此,对益生菌的研究尤为重要。


然而厌氧或微量需氧培养存在较大的困难和不便。但现在,一切即将改变!



贝克曼库尔特BioLector XT新一代高通量微生物反应器基于创新的气体处理器,可帮助客户实现严格厌氧培养,并且:

·         操作简便,无需将仪器放置在厌氧柜中,操作与好氧培养一样便捷

·         高通量,一次可并行培养 48 个样品

·         多参数在线实时监测,可同时测量多达六个参数:生物量、pH、溶氧和荧光信号

·         可进行分批培养和补料分批培养,且补料方式灵活自由

下面为2个应用实例。

干酪乳杆菌

三种培养方案: PH调控下的分批发酵和补料分批发酵(分别7.5h、10h开始补料)

培养条件:T = 37 °C, 振摇 = 600 rpm, N2=30mL/min



实时在线检测实验结果:



1、从图1可以看到,随着N2的充入,DO稳步下降。45分钟降至5%以下,4.5h低于0.5%,并继续降至0%

2、同样从图1可以看到,干酪乳杆菌在6.7h后进入平台期,三种培养方案的生物量均为42 a.u. 此后,分批培养增长缓慢,9.5h生物量达到最大44a.u.,随后稳步下降,结束时生物量为38a.u. 补料分批培养,当补料开始时,生物量增加。7.5h开始补料的分批培养的最终生物量为76.3a.u. 10h开始补料的最终生物量为65.5a.u.

3、从图2可以看到,碱的添加与干酪乳杆菌的生长相关。平台期干酪乳杆菌不生长,不产酸,不需要添加3M NaOH。补料时,干酪乳杆菌保持生长的同时产酸,为保持PH6.0,持续添加碱液。

两岐双岐杆菌

两种培养方案:PH调控下的分批发酵 & 补料分批发酵

培养条件:


T = 37 °C, n = 600 rpm, N2 30mL/min,同时在气体出口处接外置O2传感器


实时在线检测实验结果:

1, 从图3可以看到,在2.4小时滞后期之后,两岐双岐杆菌开始指数生长,分批培养的生物量最终为147.57a.u. 补料分批培养指数生长期比分批培养长,且生物量达到227.3 a.u.

2, 两岐双岐杆菌生长过程分泌乳酸,分泌量与生长相关,为保持pH6,从图4可以看到,补料分批培养添加193.56μL 3 M NaOH,而分批发酵添加量约50μL

3, 从图4也可以看到,随着N2 充入,DO稳步下降。39分钟降至5%以下,4小时低于0.5%,并继续降至0%。

4, 外置氧气传感器,16以及23h,显示氧浓度均为 0.029%


综上所述, BioLector XT新一代高通量微型生物反应器适用于厌氧培养包括严格厌氧培养。并经过了技术和生物验证。它可实现高通量48个平行培养的同时进行pH 控制和补料,且无需将仪器放置在厌氧柜中。帮助科研人员快速深入地开展益生菌等厌氧微生物的菌株筛选、培养基优化、发酵工艺参数开发等。

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