基于SPRI技术的AMPure XP纯化技术已经家喻户晓。该技术采用顺磁性的磁珠、选择性的结合特定大小的核酸，已广泛应用于NGS的纯化及片段筛选等领域。那么，如何做到精准、可重复的片段筛选呢？请看，NGS片段筛选宝典之：小片段去除秘技！

秘技1：选择合适的产品——SPRIselect！

家喻户晓的AMPure XP的设计功能是从PCR产物中纯化100bp以上的核酸片段。虽然已有大量试剂盒/论文提供了AMPure XP片段筛选的方法，但是贝克曼库尔特更推荐SPRIselect进行片段筛选，因为SPRIselect是针对精准片段筛选而优化的。

秘技2：采取合适的实验流程！

SPRI技术会优先将更大的片段结合在磁珠上。如果需要保留较大的片段，而去除小片段，那么在SPRIselect试剂与待筛选溶液混合后，通过磁力架保留磁珠、弃去上清，既可以去除小片段，而所需要保留的大片段会留在磁珠上，使用乙醇清洗后，可直接用水洗脱下来。具体流程如下图所示。

秘技3：使用正确的浓度！

SPRIselect的浓度（指反应的终浓度）越高，越有利于更小片段在磁珠上的结合。

如果想要去除溶液中的小片段核酸，可通过控制SPRIselect加入的量，来控制保留在磁珠上的片段大小。

如下图所示，

M = Marker

Shear = 1 μL of 20 ng/μL标准品水溶液

1.2x to 0.4x = 1 μL经不同浓度SPRIselect筛选后的标准品。

那么例如0.8x这样的浓度是如何计算的呢？

‘0.8x’是指待筛选样品与SPRIselect的体积比：如果使用0.8x的浓度处理50μL的样品，那么需要向样品中加入的SPRIselect试剂体积为40μL（=50μL（样品体积）* 0.8x ratio），终体系为90μL.

更具体的步骤，大家可参加说明书

关于SPRI技术的来龙去脉可点击视频了解

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