人人都是流式高手 - 样本制备 - 临床篇

在日常的临床样本处理中,你是否也遇到如下烦恼呢,kappa/lambda染色结果不稳定;胞内因子染色步骤繁琐耗时长,快来看看他们是怎么解决的。

师姐染色方案:

小贝家抗体

  • 用2 mL PBS洗涤1 mL血液样品。
  • 1次清洗:添加PBS,重新悬浮,以400g离心3分钟,弃上清。
  • 分别重复1-2次,洗涤2次和3次。
  • 在管中添加抗体:CD19-PB,Kappa-FITC和Lambda-PE
  • 加入100 μL洗涤过的血液样品。
  • 孵育30分钟(RT,避光)
  • 1ml Lyse&fix试剂
  • 孵育10分钟(RT,避光)
  • 以400g离心3分钟,弃去上清液
  • 混合并使用2 mL PBS洗涤2次,以400g离心3分钟
  • 弃去上清液并用500 μL PBS重悬细胞沉淀并充分混合
  • 2小时内上机,获取至少10万个白细胞

结果展示:

洗涤次数对结果的影响:

怎么样,染色结果是不是很漂亮。此外,再来看看师姐的胞内因子染色步骤,她为什么能够做的又快又好呢?

神器:PerFix NC
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* 文中提及货号产品,仅用于科研使用。

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