如何高效分离病毒毒株与假病毒

新冠肺炎疫情以来,新病例迅速增加,在世界范围内引起大规模爆发,并导致了相当高的发病率和死亡率。科学家已鉴定其病原体为SARS-CoV-2,2020年3月11日,WHO将COVID-19列为大流行病。在病毒研究与药物筛选、疫苗研发中新冠病毒的分离纯化是必不可少的重要步骤,利用超速离心技术高效分离病毒的方法已被国内外专家广泛认可,成为病毒分离的主要方法

中国医学科学院与北京协和医学院的研究团队通过质粒转染构建了SARS-CoV-2 S蛋白假病毒系统,证明人类ACE2(血管紧张素转化酶2)是SARE-CoV-2病毒的功能受体,同时他们对SARS-CoV-2的易感细胞系、病毒受体、侵入途径等进行了研究,揭示了病毒侵入人体细胞的具体过程,这一研究已发表在《Nature Communication》杂志。

武汉病毒研究所的石正丽研究员在2013年发表于国际顶尖杂志《Nature》的一篇研究中提到,他们从蝙蝠粪便样品中分离到一株活体的SL-CoV冠状病毒。在进行毒株提取与分离时,石正丽研究团队收集细胞培养上清液后,使用Beckman超速离心机Type 90 Ti定角转头,加入20%的蔗糖垫液80,000×g离心90分钟,对收集到的病毒颗粒进行分离与浓缩。PBS重悬后染色,进行透射电镜的观察。

新华医院与杭州BaylorOracle公司合作对于SARS-Cov-2的抗病毒药物筛选研究中,他们通过体外构建SARS-Cov-2假病毒,研究发现吲哚美辛(indomethacin)是一种有效的SARS-Cov-2抑制剂。在分离SARS-Cov-2假病毒样品时,他们同样使用20%蔗糖垫液,50,000 ×g超速离心90分钟后,用PBS重悬得到病毒样品,并用于细胞感染。

加拿大公共卫生局的研究人员在使用冷冻电子显微镜研究SARS-CoV冠状病毒与ACE2结合时的构象变化时,详细描述了他们如何使用Beckman超速离心机进行病毒分离纯化的。收集上清后,他们首先使用Beckman SW32水平转头28,000 rpm离心90分钟,PBS重悬后得到SARS-CoV病毒样品粗提产物。然后将病毒样品置于12-30%的碘克沙醇梯度液中,使用SW40转头,38,000 rpm离心2.5小时,然后收集高纯度的病毒样品用于电镜检测。

贝克曼作为离心技术领域的专家,使用贝克曼超速离心机分离纯化病毒已得到科学家的广泛认可,具有庞大的用户群体与文献支持,是您进行病毒研究的可靠选择。

自1947年第一台商用超速离心机发明以来,贝克曼库尔特离心技术已有70多年的历史。早在19世纪60年代,已有许多用户使用贝克曼离心机成功分离了多种病毒颗粒。截至现在,贝克曼超离已帮助客户分离纯化得到流感病毒、肝炎病毒、腺病毒慢病毒等多种几乎覆盖所有类型的病毒样品。贝克曼庞大的用户群体已为研究人员储存发表了数以万计的病毒分离方法与文献,助力病毒研究的同时,也使贝克曼离心机成为了当之无愧的病毒分离专家。

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