【主题一：从人精液中直接分离CD63+附睾小体——使用CytoFLEX SRT分选EVs亚群】
罗婧文 博士研究生
【课程简介】细胞外囊泡（Extracellular vesicles，EVs）是被磷脂双层包围的纳米级颗粒，在细胞间通讯和许多生理和病理过程的调节中起重要作用。EVs由不同的亚群组成，不同来源的EVs亚群不仅能反映其亲本细胞的状态，而且具有特定的生物学功能，因此分离EVs亚群具有重要意义。目前分离EVs的常用方法，例如差速超速离心、尺寸排阻色谱和聚合物介导的沉淀，只能分离整个EVs群，而无法评估不同EVs亚群间的差异。新出现的分离EVs亚群的方法，例如碘克沙醇/Optiprep梯度和基于蔗糖的密度梯度分离，主要基于不同的大小和密度，然而，组织或细胞特异性EVs亚群的物理特性通常相似，如何分离它们仍然是一个挑战。由于不同来源的EVs亚群具有不同的特异性蛋白表达，这使我们能够通过免疫亲和方法以高度特异性捕获目标EVs亚群。本研究通过CytoFLEX SRT从人精液中分离出CD63+附睾小体，是首次使用流式分选技术分离组织特异性EVs亚群的报告。
【主题二：超速离心在组织来源外囊泡纯化中的应用】
王聪 高级产品专家
【课程简介】组织来源外囊泡（Tissue-derived Evs，Ti-EV) 是存在于细胞间质空间中的 EV，相比于培养细胞系或原代细胞来源的EV，它们能更好地反应正常生理和疾病条件下复杂多细胞组织微环境的真实情况。但是由于组织的复杂性，Ti-EV的分离纯化也更加困难。让我们一起来了解下：如何使用外囊泡纯化金标准的超速离心机，对Ti-EV进行纯化和后续的异质性研究。