设计可靠的流式细胞术抗体染色混合物通常涉及大量的脑力工作,需要掌握好检测灵敏度、光谱重叠最小化和结合抗体可用性与目标标志物之间的平衡。流式细胞分析仪可及性更高,而且我们希望使用分选仪进行需要分选的实验,因此一般可取的做法是先在流式细胞分析仪上进行分选实验设计工作。
多色混合物实验从分析仪转移到分选仪确实会引入一些繁琐的步骤。分析仪和分选仪往往使用不同的软件,需要重复复杂的设门策略等实验细节,消耗额外的时间并有可能产生错误。
CytoFLEX SRT 使用 CytExpert SRT 软件进行设置和分析,这是整个平台都在使用的 CytExpert 衍生产品。软件匹配再加上
CytoFLEX S 和 CytoFLEX SRT 仪器参数匹配,用户便可在 CytoFLEX S 流式细胞仪上进行设计和分析,然后将该实验导入分选仪,最大限度减少手动步骤。
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从 CytExpert 软件导出 .xit 文件
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在本例中,根据使用说明使用 DURAClone IM T
细胞亚群试剂盒生成
CytoFLEX S 流式细胞仪数据。
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在 CytExpert SRT 软件中将 .xit 文件转换为 .xits 实验
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打开 CytExpert SRT 软件。从文件菜单中选择“转换 CytExpert 实验(Convert
CytExpert
Experiment)”
。使用顶部的“浏览(Browse)”按钮找到需要转换的
.xit 文件。使用底部“浏览(Browse)”按钮导航到存储
.xits 文件的位置。默认存储路径为
C:\Users\xxxxxxxxDocuments\CytExpert
Data\

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单击 OK,开始文件转换。转换并显示原始文件夹中所有的 .fcs 文件。增益、阈值、显示设置等设置进入新的
.xits 文件中。所有图表和符号也进入新的
.xits 文件中。
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下图显示同一个实验转换前后的情况。
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CytExpert 显示的数据。在 CytoFLEX S V-B-Y-R 仪器上采集数据。创建图、门、区域和统计数据,并应用于四个样品。
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CytExpert SRT 显示的已转换数据。图 中所示文件转换为 CytExpert SRT 文件。所有图、门、区域和统计表均已转换并在界面中显示。管工作区显示原始文件的所有样品已转移完毕。
